熒光分光光度計中熒光以及磷光怎么來的。大多數(shù)分子在室溫時均處在電子基態(tài)的最低振動能級，當物質分子吸收了與它所具有的特征頻率相一致的光子時，由原來的能級躍遷至第一電子激發(fā)態(tài)或第二電子激發(fā)態(tài)中各個不同振動能級（圖1a、圖b ）。其后，大多數(shù)分子常迅速降落至第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級，在這一過程中它們和周圍的同類分子或其他分子撞擊而消耗了能量，因而不發(fā)射光（圖1c）。

熒光分光光度計分子在第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級停留約10-9秒之后,直接下降至電子基態(tài)的各個不同振動能級，此時以光的形式釋放出多余的能量，所發(fā)生的光即是熒光(圖1d)。某些熒光物質分子在降落到第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級后，通過另一次無輻射躍遷降落至亞穩(wěn)的三重線態(tài)，又受到熱激活作用再回到第一電子激發(fā)態(tài)的各個振動能級，最后由第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級降落至電子基態(tài)而發(fā)出熒光。

這種熒光因受激發(fā)光至發(fā)生熒光的時間較長,故稱為遲滯熒光（圖1e、g、h）。產(chǎn)生熒光的第一個必要條件是該物質的分子必須具有能吸收激發(fā)光的結構，通常是共軛雙鍵結構；第二個條件是該分子必須具有一定程度的熒光效率。所謂熒光效率是熒光物質吸光后所發(fā)射的熒光量子數(shù)與吸收的激發(fā)光的量子數(shù)的比值

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